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医用一般科学相关文章

  • ABO血型系统中Aw基因分子遗传背景的研究与分析 相关:ABO血型系统 等位基因 糖基转移酶类
  • 目的:研究一个含有Aw亚型中国汉族家系的ABO基因的遗传机制。方法:对1例血型血清学鉴定为Aw亚型的样本及有关家系,采用PCR-SSP扩增、DNA测序方法,以A101-致序列进行比对,对其ABO等位基因的第6外显子、第6内含子及第7外显子进行基因克隆和单倍体测序分析。结果:血清学为Aw型样本中ABO基因序列与ABO*A101相比有两个位点发生了突变(467C>T,543G>T),文献中未见报道,为一个新的A等位基因,该样本的家系5人中,2人带有这个新变异的A等位基因。结论:543位突变倒致编码ABO糖基转移酶的156位氨基酸由脯氨酸(Pro)变为亮氨酸(Leu),大大降低了酶活性;这个位点对转移酶的活性是至关重要的。
  • 常用统计学基本概念及统计描述(2) 相关:常用统计学 基本概念 统计描述
  • 接上次讲座,我们继续讨论有关统计描述内容。
  • 大鼠bFGF基因荧光定量PCR检测方法的建立 相关:碱性成纤维生长因子 SYBR Green
  • 目的建立用荧光定量PCR方法检测大鼠bFGF基因mRNA水平。方法以Trizol一步法提取新鲜骨组织总RNA,以Oligo(dt)18为引物逆转录产生cDNA并进行扩增,以T-A克隆法将纯化的目的片断与PGEM—T Easy载体连接成重组质粒并转化E.coli DH5α。采用碱裂解法提取重组质粒,经蓝白筛选、酶切、测序鉴定后,根据标准品建立标准曲线,由软件自动计算出待测样本中靶基因mRNA准确含量,并以靶基因和内参GAPDH mRNA含量的比值作为评价靶基因表达水平的指标。结果由PGEM-T Easy—bFGF所构建的标准曲线线性关系良好(反应体系中含1×10^2~1×10^7拷贝大鼠bFGF基因分子时,扩增反应α值与拷贝数的对数成线性关系)、灵敏度高、特异性强、准确可靠。批内和批间重复性测定的变异系数分别为1.03%~4、59%以及2.24%~6.46%。结论成功建立了用实时荧光定量PCR检测大鼠bFGF基因表达量的方法。
  • 淫羊藿黄酮对被动吸烟大鼠骨量与骨形态学的影响及其相关性研究 相关:淫羊藿总黄酮 被动吸烟 骨密度
  • 目的探讨淫羊藿黄酮干预对被动吸烟大鼠骨量与骨形态学指标的影响及其相关性。方法选用2月龄SD大鼠60只,随机分为A、B、C、D、E和F6个组,经实验干预完毕后,测定或观察:①股骨和腰椎骨密度;②胫骨上段松质骨骨形态计量学静态指标中骨小梁面积百分数、骨小梁厚度、骨小梁数目、骨小梁分离度;③胫骨上段松质骨成骨细胞、破骨细胞计数;④分析骨密度与骨形态学指标之间的相关性。结果股骨和腰椎骨密度A、D、E、F组较B组的高,差异有统计学意义(P〈0.05);其他各组比较无统计学意义(P〉0.05);D、E、F组的骨密度随淫羊藿黄酮剂量的增加而增加,但组间比较差异无统计学意义(P〉0.05)。胫骨上段松质骨骨形态计量学静态指标中骨小梁面积百分数、骨小梁厚度和骨小梁数目中A、C、D、E、F组较B组的高,差异有统计学意义(P〈0.05);C、D组较A组的低,差异有统计学意义(P〈0.05);D、E、F组随淫羊藿黄酮剂量的增加而增加,但组间差异无统计学意义(P〉0.05);其他各组比较差异无统计学意义(P〉0.05)。骨小梁分离度中A、C、D、E、F组较B组的低,差异有统计学意义(P〈0.05);C、D组较A组的高,差异有统计学意义(P〈0.05);D、E、F组随淫羊藿黄酮剂量的增加而降低,但组间差异无统计学意义(P〉0.05);其他各组比较差异无统计学意义(P〉0.05)。各组大鼠胫骨上段松质骨成骨细胞计数和破骨细胞计数中A、C、D、E、F组较B组的低,差异有统计学意义(P〈0.05);E、F组较A组高,差异有统计学意义(P〈0.05);D、E、F组随淫羊藿黄酮剂量的增加而升高,但组间差异无统计学意义(P〉0.05);其他各组比较差异无统计学意义(P〉0.05)。股骨和腰椎骨密度与骨小梁面积百分数、骨小梁厚度、骨小梁数目和成骨细胞计数呈明显正相关(r=0.734、r=0.701、r=0.721及0.706,P〈0.05;r=0.743、r=0.708、r=0.712及0.717,P〈0.05)。股骨和腰椎骨密度与骨小梁分离度和破骨细胞计数呈明显负相关(r=-0.734和-0.706,P〈0.05;r=-0.743和-0.707,P〈0.05)。结论淫羊藿黄酮干预可明显改善被动吸烟大鼠的骨密度和骨形态学指标,且骨密度与骨形态学指标之间存在明显的相关性。
  • 重组人甲状旁腺素相关蛋白PTHrP1—86对骨质疏松大鼠治疗作用的实验研究 相关:人甲状旁腺素相关蛋白 骨同化作用 骨密度
  • 目的探讨重组人甲状旁腺素相关蛋白PTHrP1—86对骨质疏松大鼠的骨同化作用。方法用摘除大鼠双侧卵巢的方式制备骨质疏松模型(OVX),去势手术16周后,测定大鼠腰椎骨密度,确认动物模型造模成功。实验动物分为8个组,给药后测定骨密度、骨钙素、骨形态计量学、骨生物力学等指标,初步评价重组人甲状旁腺素相关蛋白PTHrP1—86对骨质疏松大鼠的骨同化作用。结果重组人甲状旁腺素相关蛋白PTHrP1—86可使骨转换加快,促进新骨生成,使骨的力学性能提高,抗弯曲强度提高,抗变形能力增强,韧性增高,脆性降低,不易发生断裂。结论PTHrP1—86能有效提高骨的抗骨折能力,对治疗和预防骨质疏松有一定疗效。同时证明该动物实验方法行之有效,可以很好地测定PTHrP对骨质疏松的治疗作用,并可以此为依据开始一期临床实验。
  • OPG基因敲除小鼠骨质疏松情况的研究 相关:骨保护素 基因敲除 小鼠
  • 目的研究护骨素(Osteoprotegerin,OPG)基因敲除纯合子小鼠(homozygous OPG knockout mice,OPG^-1- mice)骨质疏松发生情况,为OPG^-1-小鼠骨质疏松模型的应用提供依据。方法非频密繁殖法获得OPG^-1-小鼠,PCR技术进行OPG基因表型鉴定。16周龄OPG^-1-子代小鼠和16周OPG野生型小鼠各10只,采用双能X线骨密度测量仪(DEXA)测定全身骨密度(Bone mineral density,BMD)、万能材料试验机测定股骨生物力学强度;骨组织形态计量学分析L5椎体骨小梁结构;实时荧光定量PCR检测L1椎体骨组织中BMP-2、Runx2 mRNA表达水平。结果OPG^-1-子代小鼠和亲代纯合子小鼠表现出相同的OPG基因缺失表型。与同龄野生型小鼠比较,16周龄OPG^-1-小鼠全身骨密度、股骨承受最大载荷、股骨结构刚度、腰椎椎体骨小梁数目、腰椎椎体骨小梁厚度显著下降(t=5.740,6.069,6.859,6.891,3.558,P〈0.01);股骨承受破裂载荷、腰椎椎体骨小梁体积分数下降(t=3.157,3.329,P〈0.05);股骨承受载荷后的最大位移、破裂位移显著增加(t=-3.868,-3.276,P〈0.01);腰椎椎体骨小梁分离度增加(t=-2.575,P〈0.05),腰椎椎体Runx2 mRNA表达升高(t=-3.738,P〈0.05);腰椎椎体中BMP-2 mRNA表达升高不明显,差异无统计学意义(t=-1.589,P〉0.05)。结论OPG^-1-小鼠表现出明显的骨质疏松,是一种理想的骨质疏松模式动物。
  • 受体介导的凝血酶对成骨细胞增殖及分化的作用 相关:凝血酶 蛋白酶激活受体 成骨细胞
  • 目的通过凝血酶对成骨细胞的增殖及分化作用的研究来探讨受体介导的凝血酶的功能。方法原代成骨细胞分别取自于蛋白酶激活受体(protease-activated receptor,PAR)-1敲除鼠和野生对照鼠的头颅骨。并利用凝血酶,人工合成的PAR-1或PAR-4特异性激活短肽对细胞进行处理,通过对5-溴-2-脱氧尿嘧啶的嵌入及细胞碱性磷酸酶活性的测定探讨PAR-1或PAR-4激活对细胞增殖和分化的影响。结果在野生鼠成骨细胞,凝血酶及PAR-1激活肽均能促进的细胞增殖和降低碱性磷酸酶的活性,但PAR-4激活肽却无这些作用。然而在PAR-1敲除鼠的成骨细胞无论是凝血酶还是PAR-4激活肽均不能改变细胞的增殖及碱性磷酸酶的活性。结论本研究结果表明凝血酶促进成骨细胞增殖及抑制其分化是通过PAR-1介导的。其他凝血酶受体并不具有此作用。
  • 肾上腺功能低下及补充肾上腺皮质激素对大鼠骨组织影响 相关:肾上腺功能低下性骨质疏松 大鼠 模型
  • 目的基于下丘脑-垂体-肾上腺轴内分泌环的调控影响骨质变化理论基础,建立肾上腺功能低下动物模型,研究肾上腺功能低下及补充肾上腺皮质激素对骨组织的影响。方法使用SD大鼠进行肾上腺次全切除手术,建立肾上腺功能低下动物模型。给予动物模型不同剂量糖皮质激素替代治疗,研究其对骨组织的影响。结果手术后大鼠出现了肾上腺功能低下状态。小剂量激素替代治疗后检测指标显示恢复性变化,大剂量激素治疗无明显改善。股骨生物力学实验提示骨力学综合能力指标下降。结论①肾上腺功能变化伴有骨代谢改变,骨组织形态计量学变化先于骨生物力学;②利用肾上腺次全切除后给予糖皮质激素替代治疗,可以造成骨质疏松;③糖皮质激素具有双重作用,小剂量激素替代治疗有助于修复骨质的损伤,大剂量糖皮质激素对骨质有损伤或加重损伤的作用;④肾上腺功能低下性骨质疏松生物力学变化是力学综合能力降低。
  • 去势大鼠骨髓细胞IL-6基因表达及骨组织学变化观察 相关:去势大鼠 白细胞介素-6 基因表达
  • 目的观察去势大鼠骨髓细胞白细胞介素-6基因表达和骨组织学的变化。方法健康3月龄雌性SD大鼠48只,24只作为假手术对照组,24只手术切除双侧卵巢。分别于去卵巢后4、6、8、12周取去势组和对照组各6只大鼠骨髓细胞提取RNA(左侧股骨)。PCR方法检测IL-6基因表达和骨组织学(右侧股骨)观察。结果术后4周,实验组骨髓细胞IL-6基因均呈弱表达,6周呈强表达,8和12周表达水平较峰值下降,但仍高于对照组。去势后对照组各时间段IL-6基因表达水平未见变化。术后4、6和8周实验组骨组织学未见明显变化;12周骨髓腔扩大,骨皮质变薄,骨小梁变细,见断裂现象。结论绝经后骨质疏松的发生与IL-6基因水平增强有一定的关系。
  • 地塞米松促进大鼠血管钙化的实验研究 相关:地塞米松 骨质疏松 血管钙化
  • 目的在大鼠血管钙化模型上,探讨地塞米松对血管钙化的影响。方法在维生素D3加尼古丁诱导制备的大鼠血管钙化模型上,给予地塞米松肌肉注射,制备血管钙化加骨质疏松复合模型,观察地塞米松对血管钙化的影响。Wistar大鼠共分为4组,即对照组、骨质疏松组、钙化组和钙化加骨质疏松组。8周后,进行主动脉钙含量测定、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性及骨钙素(osteocalcin,OC)含量测定,判断血管钙化程度;用骨密度仪测定大鼠骨密度以反映骨质疏松程度。结果在钙化加骨质疏松组,其血管钙含量(183.39±7.22)nmol/(mg·pr)高于单独钙化组(111.72±8.58)nmol/(mg·pr)(P〈0.01);钙化组腰椎骨密度(0.18±0.01)g/cm^2低于正常对照组(0.20±0.006)g/cm^2(P〈0.01)。结论地塞米松所致的骨质疏松症可能会加重血管钙化;血管钙化也可能促进骨质疏松症的发生,其机制有待进一步探讨。